中兽药药材及粉散制剂的显微鉴别方法

中兽药药材指的是中药药材和饮片。中兽药粉散剂指的是中药药材或饮片经粉碎研磨后制成的中药成方粉散剂和中药成方超微粉。中兽药显微鉴别法指的是利用显微镜对中药药材、粉末及粉末制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的方法。由于是利用显微镜对药材进行观察鉴别，所以该方法称为“显微鉴别法”。显微鉴别法是目前《中华人民共和国兽药典》中中兽药药材和中成药鉴别的主要方法，通过观察药材和成方制剂中各药材特异的组织结构，既可以检测成方制剂中的所列的所有组分，还可以检测出制剂中未包含的成分，如添加成方组分外的其他中药或添加化药，是中兽药进行定性判定真假兽药的主要鉴别方法之一。

药材经过初加工后，原有的外表特征将发生变化，特别是粉散剂和片剂，这些经过药材经过粉碎和研磨后，肉眼很难进行辨别和鉴定。所以在进行显微鉴别时，就要经供试的药物进行处理，制成适用于显微镜镜检的切片进行观察。根据供试药材的不同，其制片方法也不一样，最常用的主要有原药材的切片显微鉴别和粉散剂的粉末显微鉴别。

1、药材显微鉴别法

切药材显微鉴别法是将药材的某一部位制成各种切面的切片，通过观察各种切片中药材的组织结构对药材进行鉴别，该方法主要适用于完整药材的鉴别。

1.1药材的预处理

首先要对药材进行清洗，除去药材表面的泥沙和灰尘，然后选择药材欲观察的部位，将欲观察的部位切成大小适当的块或断，以长3厘米和宽1厘米为宜。切成的块或者段切面要平整。在进行切块或切段时要根据药材的质地进行切片，软硬适中的药材可以直接进行切块；对于质地坚硬的要将其软化后切块；质地过于柔软的药材，可将其浸入乙醇中进行浸泡，待其变硬后进行切片。对于叶子类药材可用通草或向日葵的茎髓作为夹持物进行切片。

1.2制片方法

药材的制片方法主要有手工切片和机器切片两种，即徒手切片和滑走切片机切片。徒手切片是检验工作中最常见的切片制片方法，该方法操作简便、制片迅速，制成的切片可保持其细胞内含物的固有形态，便于进行各种化学反应显微观察。徒手切片可以直接有手固定药材进行切片，也可利用相应的夹持物固定住药物，利用手持刀片或切片机进行切片。滑走切片机切片时要对切片机进行调试，直至能切出所需要的切片。在进行切片操作时，为了防止切片粘在刀片上，可在药材的切面和刀刃之间加水和乙醇使其保持湿润。切好的切片用毛笔蘸水轻轻从刀片上推入盛有水或50%乙醇的培养皿中。

1.3装片和观察

选取制备好的切片置于载玻片上，根据不同的观察对象，滴加合适的试液1～2滴，盖上盖破片，即可在显微镜下观察。必要时滴加水合氯醛试液进行透化处理后盖上盖玻片进行镜检。进行透化处理时，将切片放在载玻片上，滴加1～2滴水合氯醛试液，在酒精灯上进行加热，待边缘起泡后停止加热，然后补加水合氯醛试液适量继续加热，直至透化完全为止。透化后放冷，加甘油乙醇试液1-2滴后加封盖片，贴上标签。将制备好的切片在显微镜下观察。

2、粉末显微鉴别法

粉末显微鉴别法主要用于粉末状的药材及中成药散剂或中药超微粉的显微鉴别。药材要制成粉末后进行镜检，中药成方粉散剂可直接取样制片后进行镜检观察。

2.1药材粉末的制备

采用粉末制片观察药材时，要对供试药材进行干燥处理，然后磨或者锉成粉末。粉末制备时，注意取样的代表性，应注意各部位的全面性，例如：根要切取根头、根中段及根尾灯部位，必须全部磨成粉，不得丢弃渣头。并需通过4号筛，混合均匀。干燥时，一般温度不能超过60℃，避免经受高温，使淀粉糊化，难以观察其完整性。

2.2制片和观察

在制片前要将供试粉末药物进行充分混匀，保证取样具有代表性，用微量取样勺挑取供试品的粉末少许，置于载玻片中央偏右的位置，滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适宜的试液1～2滴，用细玻璃棒充分搅拌，使试液和粉末完全混合。用左手食指与拇指夹持盖玻片的边缘，使其左侧与药液层左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧轻轻往下放，则液体逐渐扩开充满盖玻片下方。如水合氯醛试液少，未能充满盖玻片时，为防止气泡的产生，可以从边缘的空隙滴加试液。如试液较多，可以用吸水纸吸去多余的试液。必要时可滴加水合氯醛试液进行透化处理后盖上盖玻片进行镜检。透化方法同药材制片透化方法。透化后放冷，加甘油乙醇试液1-2滴后加封盖片，贴上标签。将制备好的切片在显微镜下观察。

3、鉴别结果判定

在对药物进行显微鉴别判定时，一定要按照《中华人民共和国兽药典》中有关各药材和中成药的显微鉴别规定进行显微鉴别。将观察到的组织结构和兽药典中规定的要求进行比较，如符合判定为符合规定，否则为不符合规定。为了提高显微鉴别的正确性，可将供试药物的中药对照药材或已经鉴定品种的中药材进行对照比较，或者参照《中华人民共和国兽药典中药显微鉴别和薄层色谱彩色图集》中收录的图片进行对照比较。